細(xì)胞原位分子互作是一種可以在活細(xì)胞狀態(tài)下觀察分子間相互作用的新型技術(shù)手段。該技術(shù)利用特異性抗體或親和素等結(jié)合分子標(biāo)記,將待研究的分子標(biāo)記為可觀察的分子,然后通過顯微鏡等技術(shù)觀察標(biāo)記分子在細(xì)胞內(nèi)的分布和相互作用情況。
一、技術(shù)的原理
該技術(shù)主要分為兩種:免疫共聚焦顯微鏡和原位雜交技術(shù)。
免疫共聚焦顯微鏡技術(shù)利用特異性抗體與待研究分子標(biāo)記相結(jié)合,將待研究的分子標(biāo)記為可觀察的分子。然后通過高倍率顯微鏡觀測(cè)標(biāo)記分子在活細(xì)胞中的分布和相互作用情況。該技術(shù)主要適用于觀察細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)、糖類等分子之間的相互作用。
原位雜交技術(shù)則是利用特異性親和素將待研究分子標(biāo)記為可觀察的分子。然后通過顯微鏡觀測(cè)標(biāo)記分子在活細(xì)胞中的分布和相互作用情況。該技術(shù)主要適用于觀察細(xì)胞內(nèi)基因之間的相互作用。
二、應(yīng)用
細(xì)胞原位分子互作技術(shù)在生命科學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用前景。以下列舉幾個(gè)典型的應(yīng)用:
1.揭示蛋白質(zhì)之間的相互作用。細(xì)胞內(nèi)部存在著大量的蛋白質(zhì),它們之間的相互作用對(duì)于細(xì)胞功能的發(fā)揮至關(guān)重要。通過該技術(shù),可以觀察蛋白質(zhì)之間的相互作用情況,從而揭示其生物學(xué)功能和調(diào)控機(jī)制。
2.研究基因之間的相互作用。基因之間的相互作用對(duì)于生物體的表觀遺傳和發(fā)育調(diào)控具有至關(guān)重要的影響。通過該技術(shù),可以觀察基因之間的相互作用情況,從而揭示其生物學(xué)功能和調(diào)控機(jī)制。
3.研究細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)通路。細(xì)胞內(nèi)的信號(hào)傳導(dǎo)通路是細(xì)胞生命活動(dòng)的核心,細(xì)胞內(nèi)分子之間的相互作用是其發(fā)揮作用的關(guān)鍵。通過該技術(shù),可以觀察細(xì)胞內(nèi)分子之間的相互作用情況,從而揭示信號(hào)傳導(dǎo)通路的生物學(xué)功能和調(diào)控機(jī)制。